ALSTEM慢病毒的濃縮與純化方法
慢病毒沉淀溶液是針對慢病毒顆粒沉淀而優化的聚合物的混合物。它為濃縮慢病毒顆粒提供了一種簡單,快速和的方法。在簡單的方案中,您只需將慢病毒上清液與慢病毒沉淀溶液混合,孵育一小段時間,然后在標準離心機中旋轉混合物。您可以將慢病毒滴度提高至4倍,并且無需超速離心即可獲得的回收率。Lentivirus沉淀解決方案是一個5x解決方案。
1.將含有慢病毒顆粒的培養基從平板轉移到無菌容器中,并以300×g離心培養基10分鐘以除去細胞碎片。
2.通過0.45μm過濾器過濾上清液。
3.將過濾的上清液轉移到無菌容器中,并向每4體積的含有慢病毒的上清液中加入1體積的冷的慢病毒沉淀溶液(4℃)。(實施例:5ml慢病毒沉淀溶液,含20ml病毒上清液)。
4.充分混合并冷藏3小時至過夜。與Lentivirus沉淀溶液混合的含有慢病毒的上清液在4°C下可穩定長達4天。
5.在4℃下以1500×g離心混合物30分鐘。離心后,慢病毒顆粒可在容器底部顯示為米色或白色顆粒。
6.丟棄上清液。通過以1500×g離心5分鐘來旋轉殘留溶液。通過抽吸去除所有的液體痕跡,小心不要打擾顆粒中沉淀的慢病毒顆粒。
7.使用冷的無菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始體積重懸慢病毒顆粒。
8.在低溫小瓶中分裝并儲存在-80°C直至準備使用。
ALSTEM是一家位于灣區的早期生物技術公司,擁有快速擴展的產品和服務組合,為生物制藥和學術機構提供服務。受到加利福尼亞干細胞研究承諾的啟發,ALSTEM于2012年由具有iPS細胞重編程和基因組編輯技術專業知識的科學家創立。
描述
慢病毒沉淀溶液是為慢病毒顆粒沉淀而優化的聚合物混合物。它為濃縮慢病毒顆粒提供了一種簡單,快速和的方法。在這個簡單的方案中,您只需將慢病毒上清液與慢病毒沉淀溶液混合,孵育一小段時間,然后在標準離心機中旋轉混合物。您可以將慢病毒滴度提高至4倍,并且無需超速離心即可獲得的回收率。Lentivirus沉淀解決方案是一個5x解決方案。
特征
產品規格
產品名稱 | 慢病毒沉淀解決方案 |
目錄 # | VC100 |
尺寸 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 |
運輸 | 環境溫度 |
儲存和穩定性 | 儲存在4°C。根據指示儲存,本產品可穩定保存6個月 |
質量控制 | 每批慢病毒沉淀溶液都經過無菌和成功沉淀慢病毒顆粒的測試。 |
安全須知 | 對于含有BSL-2生物的所有材料,請遵循推薦的NIH指南。始終戴上手套,使用過濾的吸頭并在生物安全罩下工作。 |
限制使用 | 僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序。 |
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