EUROIMMUN微孔板ELISA
更新時間:2019-12-10 點擊次數:1242
EUROIMMUN microplate ELISA
EUROIMMUN微孔板ELISA
測試原理
- 涂有純化,生化特性已鑒定的抗原的聚苯乙烯微孔板條用作包含結合抗原的固相。
- 如果樣品呈陽性,則稀釋的血清樣品中的特異性抗體會附著在與固相偶聯的抗原上。
- 第二步,用過氧化物酶標記的抗人抗體檢測附著的抗體。
- 第三步,使用能夠促進顯色反應的色原/底物溶液使結合的抗體可見。產生的顏色強度與血清樣品中抗體的濃度成正比。
- 單特異性ELISA(具有單個抗原的酶免疫測定)為檢測抗體提供了定量的體外測定。“ Profile ELISA”提供了一種半定量體外測定法,用于檢測單個微孔板條上的不同抗體。
- “ Pool ELISA”的固相涂有抗原混合物,用于半定量檢測抗體,其特異性必須隨后通過單特異性測定進行研究。
可靠,經濟的校準/評估
- 在定量ELISA的情況下,通常使用三個校準血清進行校準。
-校準血清1:測量范圍的上限
-校準血清2:正常范圍的上限(臨界值)
-校準血清3:陰性
- 無需孵育空白值或重復測定。
- 僅使用一個校準器即可進行半定量ELISA。在某些ELISA中可找到擴展的校準曲線,用于免疫測定或CSF診斷。
- 以相對單位(RU / ml)進行校準,如果存在參考血清,則以單位(IU / ml)進行校準。
- 可以選擇使用測試套件中包含的陽性或陰性對照血清來執行每個測試。提供了每種校準物和對照血清的試劑盒特定參考范圍。
- 使用常規ELISA軟件可以輕松執行所有校準方法。
簡單,快速,經濟的處理
- 含有斷裂孔的微孔板條(Profile ELISA除外)。
- 為避免混淆,微孔板條或試劑孔上印有抗原縮寫。
- 準備使用的試劑(洗滌緩沖液:濃縮液)。
- 顏色編碼可以清楚地識別試劑。
- 暗紅色:校準血清1
- 紅色:校準血清2
- 淡紅色:校準血清3
- 深藍色:陽性對照血清
- 綠色:陰性對照血清
-樣品緩沖液和抗人Ig POD綴合物:不同的顏色
- 傳染性血清學ELISA(檢測IgM類抗體)的樣品緩沖液已經包含IgG / RF吸收劑。
- 與所有商用洗衣機和閱讀器系統兼容。
低抗體抗體的測定
- 通過研究抗體的親和力已經建立了新鮮感染的血清學診斷的替代原理。
- 感染后免疫系統的一個反應是低抗體的形成。隨著感染的進行,越來越多的抗原適應性IgG形成,并且親和力增加。只要尚未在血清中檢測到高親和力的IgG,就可以認為感染仍處于早期階段。
- 為了鑒定患者血清中的低抗體抗體,平行進行了兩次酶標板ELISA:一項以常規方式進行測試,另一項包括在患者血清與過氧化物酶標記的抗人IgG孵育之間進行尿素處理,結果低抗原性抗體與抗原的分離。
- 如果通過尿素處理顯著降低ELISA的滅絕率,則存在低抗體抗體。為了客觀地解釋,可以在有和沒有尿素孵育的情況下,從測量值中計算出相對親和力指數(RAI)。
- 血清稀釋度1:100,共軛類抗人IgG,POD標記。
- 3點校準,定量(IgG)。
- 可以使用以下檢測試劑盒來確定親和力:弓形蟲,CMV,麻疹病毒,風疹病毒,VZV,TBE病毒,EBV-CA。
腦脊液中的抗體測定
- 適應癥:大腦局部感染。
- CSF稀釋度1:2,血清稀釋度1:404。綴合類別抗人IgG或IgM,POD標記。
- 易于操作:即用型試劑。
- 4點校準,定量。相同的孵育條件和時間(室溫; 60分鐘/ 60分鐘/ 15分鐘):用于CSF診斷的所有EUROIMMUN ELISA可以毫無困難地組合在一塊相同的微孔板上。
- 在一塊相同的微孔板上平行于CSF中的抗體濃度確定患者血清中的抗體濃度。CSF /血清商CSQ 路徑。從兩個測量值計算得出。
- 如果特異性抗體CSQ 路徑的CSF /血清商數存在,則存在鞘內特異性抗體的合成。顯著高于整個IgG的CSF /血清商(CSQ total)或CSQ lim(如有必要)。。這兩個值的關系表示相對CSF /血清商CSQ rel。(同義詞:抗體特異性指數,ASI)。
- 結果解釋(根據Reiber教授的建議):
- CSQ rel。<0.6:結果不可靠,請檢查
CSQ rel是否存在錯誤。0.6-1.3:標準范圍 - CSQ rel。1.3-1.5:邊界范圍
CSQ 相對。> 1.5:指示中樞神經系統中病原體特異性抗體的產生 - 用于CSQ rel的自動計算。EUROIMMUN免費提供特定的Excel表。
- 高的靈敏度,特異性和可重復性。血清和腦脊液中的抗體濃度可以在整個線性測量范圍內確定。
- 提供以下用于CSF診斷的測試試劑盒:伯氏疏螺旋體,弓形蟲,HSV-1,HSV-2,HSV-1 / 2池,CMV,風疹病毒,麻疹病毒,腮腺炎病毒,VZV,TBE,EBV-CA。
- 所有用于CSF診斷的測試系統也只能用于血清學。
- *適合于孵化設備中的自動孵化。
-
孵化
微孔板ELISA孵育
移液器:
每孔100 µl
孵育:
30分鐘
移液器:
每孔100 µl
孵育:
30分鐘
移液器:
每孔100 µl
孵育:
15分鐘
移液器:
每孔100 µl
評估:
波長為450 nm的光度測量
另請參閱自動化選項。
執行測試時,將使用當前有效的測試指令。