interchim FT-664790說明書
pNPP溶液(ELISA用AP底物)
描述
Uptima pNPP底物是用于檢測堿性磷酸酶(AP)的顯色底物,產生黃色可溶性副產物。經典用于ELISA技術。該處方針對較長的有效期和良好的批間重現性進行了優化。在含有高純度和穩定劑的對硝基苯基磷酸鹽(pNPP)混合物的*小瓶中對其進行調節。與堿性磷酸酶結合物反應后,產生深黃色,可在405 nm處讀取。Uptima提供了需要準確和靈敏結果的優化處方。該底物不適用于免疫化學或蛋白免疫印跡法(要求Uptima提供合適的替代底物)。
產品編號: UP664790,200 mL UP664791,500 mL UP664792,1 L
靈敏度 Uptima pNPP底物非常敏感,產生的背景非常低。
在大多數應用中,Uptima pNPP通常優于其他可用的AP底物,并且通常與過氧化物酶相似的顯色檢測系統。
穩定性 底物在 + 4 ℃下可穩定儲存30個月以上。
儲存條件 + 4 ℃下避光儲存。(L)
pNPP底物對某些儲存和使用條件敏感:
1. 避免直接光暴露或接觸污染物質。
2. 請勿直接從瓶中移?。菏紫葘⑺枞芤貉b入潔凈容器中
3. 請勿將瓶子打開 過長
4. 采用冷凍凝膠包運輸。請勿冷凍。
建議方案
Uptima pNPP為即用型。只需讓所需量達到室溫即可。
1. 可根據您的標準方案進行ELISA試驗。*清洗微孔板,以除去未結合的堿性磷酸酶標記探針(抗體、凝集素、核苷酸……)。沖洗不充分可能導致背景不理想。Uptima建議在PBST(NaCl 150 mM、磷酸鹽20 mM、Tween20®0.1%,pH 7.5)中清洗4次。
2. 向各微孔板小孔中加入150µl pNPP底物。緩慢攪拌以混勻。在 + 37 ℃下避光孵育30分鐘。立即顯色。
注:Uptima pNPP溶液為即用型。請勿稀釋。
可根據檢測系統調整每孔體積和孵育持續時間。
如果染色過快或過強,應稀釋一抗或二抗,或將染色時間縮短至15 min。不建議稀釋pNPP底物
3. 在405 nm處直接讀取吸光度,或在停止步驟(第4點)后讀取,以獲得更準確的結果。請勿比較停止和未停止時獲得的值。
4. 反應終止(可選):在每個孔中加入100µl終止液(1 MNaOH)。顏色保持黃色,但不波動,允許在2小時或更長時間內在405 nm處讀數。
相關試劑
· 其他AP底物-顯色 其他HRP底物-顯色pNPP粉末(UP89562 C)、片劑(#UP89562F、UP73250)和試劑盒(BP708) TMB溶液(UP664780)
AP-藍色[490-650 nm](CB0131)和AP-紅色[450-550 nm](CB0141) DAB片劑732310
· 其他AP底物-熒光 FDP粉末和試劑盒(HT079) ADHP(39423A,試劑盒HS6241)
· 其他AP底物-化學發光 VisGlo AP底物(BV3021,BV3031)UptiLight ECL(UP996190,(BM4961,58372A)
· 請參閱我們的BioScience目錄,了解AP標記的二抗(第A324頁)和鏈霉親和素(A350)、緩沖液和飽和劑(A365)
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