牛胰腺脫氧核糖核酸酶是一種內切核酸酶,可分裂磷酸二酯鍵,優先與嘧啶核苷酸相鄰,產生在3'位具有游離羥基,在5'位具有磷酸基的多核苷酸。極限消化的平均鏈長是四核苷酸。
用途:沃辛頓(Worthington)為不同應用提供不同純度的DNase。產品代碼:DPRF和DPRFS都是專門為分子生物學應用設計的,并且含有低水平的RNase和蛋白酶活性。它們都適合用于在完整的RNA回收中需要DNA消化的技術中,或必須保持結構蛋白或酶的完整性的技術中。應用包括缺口翻譯,DNA定位,核RNA和蛋白質的分離,質粒構建以及RNA探針和RT-PCR的RNA聚合酶合成。DNase還用于組織培養工作,以從受損細胞中消化DNA,從而降低粘度并去除膜結合的DNA片段。沃辛頓代碼:DP和DCLS適用于這些應用。
穩定性/儲存性:正確存放后,所有等級的沃辛頓脫氧核糖核酸酶都可以穩定2-3年。所有等級的沃辛頓DNA酶的建議存儲溫度為2-8°C。產品代碼DPRFS可以存儲在-20°C下。為了長期保存在溶液中,可以將產品代碼D和DPFF溶于5mM乙酸鹽,1mM鈣,pH 4.5中,并以單次使用的等分試樣在-20°C或-70°C下保存長達一年。僅凍結并融化一次;解凍后的等分試樣至少要穩定冷凍幾周。添加50%的甘油將在-20°C保持液態,而不會影響穩定性,并且可以去除50%甘油中的物質,并反復回到-20°C。由于缺乏蛋白酶,DPRF非常穩定。要在重構后長期保存DPRF,請使用水或pH 4.0至9.0以外的任何緩沖液(磷酸鹽除外);避免鈣螯合劑;加入50%甘油,在-20°C下以液體形式存儲;分裝在一次性容器中;只凍結和融化一次;解凍后的等分試樣至少要穩定冷凍幾周。
單位定義:1當作用于pH 5.0的高度聚合的DNA時,在260 nm處的吸光度每分鐘每毫升0.001導致增加0.001每分鐘。 注意:其他供應商報告的Kunitz單位可能比在Worthington測量的Kunitz單位高2到4倍。如在沃辛頓(Worthington)測得的,一個Kunitz單元在50µl反應中于37°C在50mM Tris,1mM Mg 2 +,1mM Ca 2 +,pH 7.8中于10分鐘內消化1µgλDNA 。對于其他DNA和緩沖液系統,消化單位與Kunitz單位的相關性是不同的。
技術說明:產品代碼DPRF:每10,000單位DNase I,每個樣品瓶包含約2mg甘氨酸和2µmoles鈣。將整個樣品瓶溶于5ml可提供相當于1 mg / ml的溶液。
相關產品:
白蛋白,無核酸酶(BSANF)
脫氧核糖核酸酶II(HDA / HDAC / HDACS)
E•RASE RNase A / T1共混物(RCT)
組蛋白(H,NHL)
溶菌酶(LY / LYSF)
核酸酶,微球菌(NFCP)
核酸酶,S1( SINUC / SINUCL)
核酸,DNA,大腸桿菌,λ/片段,RNA
磷酸酶,堿性(CAP / BAPF / BAPC / BAPSF / PC)
磷酸二酯酶I(VPH)
磷酸二酯酶II(SPH)
蛋白酶K(PROK / PROKS)
反向轉錄酶,重組HIV(RTHIV)
核糖核酸酶A(R / RAF / RASE / RS / RPDF)
核糖核酸酶T1,無動物源(RT1S)