haemtech 玉米胰蛋白酶抑制劑說明書
CTI對正常人血漿的APTT和PT
的影響該圖說明了添加的CTI對正常人血漿的PT和aPTT的影響。將 CTI 添加到正?;旌系娜搜獫{中以達到不同的最終濃度,并在進行分析之前讓混合物在冰上孵育一小段時間。PT 保持不受影響,而 aPTT 加倍,每毫升血漿添加約 60 微克 CTI。
尺寸 | 1毫克 |
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公式 | 20 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.4 |
分子量 |
貯存 | -80°C |
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純度 | >95% SDS-PAGE |
化合物 |
化驗 | aPTT檢測 |
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保質期(正確儲存) | 12個月 |
化學式 |
尺寸 | 25 X 2 毫升、25 X 3 毫升、25 X 5 毫升 |
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公式 | 11 mM 檸檬酸鹽,50 ug/mL CTI(最終) |
分子量 |
貯存 | 4°C |
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純度 | 不適用 |
化合物 |
化驗 | 不適用 |
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保質期(正確儲存) | 6個月 |
化學式 |
純化的 CTI
玉米胰蛋白酶抑制劑 (CTI) 是一種小蛋白,存在于大多數玉米品種的籽粒中。CTI 不僅是胰蛋白酶抑制劑,而且在凝血實驗中測試時也是一種特定的人因子 XIIa 抑制劑 (1-6)。該抑制劑與胰蛋白酶或因子 XIIa 形成一對一的復合物,當添加到血漿中時,會延長活化的部分凝血活酶時間而不影響 PT 測定 (6)。因子 XIIa 的特異性使抑制劑可用于組織因子 (TF) 依賴性凝血反應的分離和研究 (6)。
文獻 (6, 8-10) 中記載了使用 CTI 研究 TF 依賴性反應。研究表明,當試圖在全血或血漿樣品中進行 TF 依賴性測定時,抑制凝血的接觸途徑是不可少的。在樣品收集點添加 CTI 可防止在后續樣品處理步驟中激活接觸通路,從而減少體外偽影。當試圖在低 TF 濃度下工作時,CTI 最常見的用途是與凝血酶生成分析有關。HTI 的 CTI 產品已針對此特定應用進行了性能測試。
該蛋白質由 112 個氨基酸組成,計算出的分子量為 12,028 (7)。計算的分子量與通過純化蛋白質 (12,500) 的沉降平衡分析確定的分子量非常吻合 (3)。將 CTI 的氨基酸序列與其他胰蛋白酶或絲氨酸蛋白酶抑制劑的氨基酸序列進行比較,發現幾乎沒有或沒有相似之處 (7)。
CTI 使用已公開程序的組合進行純化 (3,4)。為了開始純化過程,將 CTI 從新鮮甜玉米的籽粒中提取到生理緩沖液中。然后使用丙酮將提取物脫脂,并通過使用凝膠過濾和離子交換層析進一步純化蛋白質。最終的 CTI 制劑在還原和非還原條件下通過 SDS-PAGE 分析顯示為單條帶。
測試 CTI 制劑在不影響 PT 分析的情況下延長 aPTT 分析的能力。測定每批CTI的比活,定義一個單位為使正常人血漿aPTT加倍所需的CTI量。
純化的 CTI 在 20 mM Tris、0.15 M NaCl、pH 7.4 中配制,應在 -20°C 或更低溫度下冷凍儲存。
采血管
為了簡化添加 CTI 的樣本采集過程,HTI 開發了含有 CTI 的采血管。這些管(我們的 SCAT-27 系列)允許您將血液直接抽到含有 CTI 的抗凝劑上,從而簡化了進行 TF 相關研究的過程。您可以選擇使用我們的標準 CTI/檸檬酸鹽配方(11mM 檸檬酸鹽,50 ug/mL CTI),也可以創建自己的定制配方。HTI 的采血管不是無菌的,制造和銷售僅供研究使用。盡管可以為您制造定制尺寸,但可提供三種標準尺寸。
SCAT-27-4.5/5 - 5 毫升管
SCAT-27-2.7/5 - 3 毫升管
SCAT-27-1.8/5 - 2 毫升管
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