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BioGenes 中文介紹

更新時間:2016-02-01      點擊次數:2462

BioGenes新一代宿主細胞殘留蛋白(HCPELISA檢測試劑盒

準確定量檢測殘留的宿主細胞殘留蛋白(HCP)是病毒性疫苗或基因工程產品生產的關鍵質控標準。BioGenes公司優化的360 - HCP檢測試劑盒檢測宿主細胞蛋白(HCP)比傳統檢測具有顯著的優勢。通過提供四個試劑盒包(每個包使用不同的anti-HCP抗體),通過比較選取zui適檢測試劑盒檢測HCP,增加了HCP檢出的特異性和靈敏度。因此可zui大限度的減少了anti-HCP抗體不能*檢測終產品中HCP的可能性。而傳統的HCP檢測只是使用一個抗體進行檢測,因此增加了部分HCP不能檢出的可能性。

 

BioGenes產品說明書:

1、CHO|360-HCP ELISA

CHO|360-HCP ELISA是為中國倉鼠卵巢細胞(CHO)作為宿主細胞的生物制品進行HCP檢測的試劑盒,擁有高度特異性和靈敏度,覆蓋率更多的CHO蛋白譜。

通過用模擬轉染CHO-K1 CHO-S細胞的HCP免疫家兔或山羊,然后結合BioGenes公司*的抗原和抗體制備技術(優化的蛋白純化技術)得到HCP多克隆抗體。使用事先準備好的不同抗原(總HCP或分級HCP)每個分級HCP分別用于免疫動物,因而得到四個不同HCP ELISA檢測試劑盒(AD),這四個試劑盒共同組成360 - HCPHCP ELISA檢測體系。

 

HCP超級檢出率:

CHO|360-HCP ELISA試劑盒經大量的模擬CHO-HCP樣本檢測測試。在大多數情況下可以從四個檢測試劑盒中找出*的HCP檢出率的試劑盒。如上圖樣本4可以看出,D型試劑盒可以檢出大于90%HCP,比ABC三種類型更為適用于該樣本,而普通商業化的檢測試劑盒只能檢出約20%HCP。

 

 

 

更高的檢測特異性:

LOD0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ 2 – 3 ng/mL

檢出范圍:2 – 100 ng/mL

 

2、E.coli|360-HCP ELISA

E.coli |360-HCP ELISA是為大腸桿菌(E.coli)作為宿主細胞的生物制品進行HCP檢測的試劑盒,擁有高度特異性和靈敏度,覆蓋率更多的E.coli蛋白譜。

E.coli|360-HCP Assay試劑盒是利用在不同培養基和培養條件下發酵的W3110BL21(DE3) 細胞株產生四種具有不同HCP蛋白譜的抗原。然后用這四種抗原免疫山羊得到四種不同的HCP ELISAs試劑盒(AD),四者共同構成E.coli|360-HCP Assay 檢測體系??赏ㄟ^考馬斯染色E.coli HCP和不同抗體的2D western blotting 檢測確定zui高特異性的試劑盒。

 

HCP超級檢出率:

E.coli |360-HCP ELISA試劑盒經大量的模擬大腸桿菌-HCP樣本檢測測試。如上圖可以看出,可以看出,B型試劑盒可以檢出樣本1中大于 80%HCPA型試劑盒是樣本23的*檢測試劑盒,而樣本5的*檢測試劑盒是D型試劑盒。

 

 

更高的檢測特異性:

LOD0.5 – 1.0 ng/mL

LOQ 2 – 3 ng/mL

檢出范圍:2 – 100 ng/mL

 

3、*試劑盒選擇的方法:

如實驗中選取中國倉鼠卵巢細胞(CHO)作為宿主細胞,則選擇CHO|360-HCP ELISA試劑盒進行HCP檢測;如實驗中選取大腸桿菌(E.coli)作為宿主細胞,則選擇E.coli |360-HCP ELISA試劑盒進行HCP檢測。然后根據以下方法對具體的試劑盒型號進行選擇。

1)預實驗選取法:

該方法是采用The 360-HCP ELISAs Starter Set包(內含A-D型四種不同的檢測試劑盒),通過預實驗選取zui適試劑盒類型進行后續實驗。實驗流程如下圖:

 

 

2BioGenes公司鑒定服務推薦法

除上述客戶自行確定*試劑盒法外,BioGenes還提供試劑盒性能試驗并推薦*試劑盒的服務。

方法1

360-HCP ELISA kits (type A to D)檢測含HCP樣本,流程為:

1)客戶提供4-8個不同純化階段的樣本;

2)兩次重復實驗進行確定;

3)每個樣品多達4個稀釋倍數;

4BioGenes推薦一個*的ELISA檢測試劑盒類型,同時附一個簡短的推薦報告。

方法2

2-D蛋白印記分析模擬的HCP2-D蛋白印記分析可以獲得抗HCP抗體對存在于宿主細胞株中全部HCP的范圍評估信息,以獲取確信的zui適抗體類型和水平,流程為:

12-D 分離和考馬斯藍銀染色和銀染;

2)使用不同抗體稀釋度進行免疫印跡;

3)完成包括蛋白范圍的報告;

4)推薦zui適ELISA檢測試劑盒類型,同時附一個簡短的推薦報告。

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